关于冷冻细胞活化

发布时间:2024-06-10
1.冷冻原则
冷冻细胞之活化原则为快速解冻,以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害,导致细胞之死亡。
2.细胞活化后,约需数日,或继代一至二代。其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。
3.材料 :
①37 oc 恒温水槽
②新鲜培养基
③无菌吸管/ 离心管/ 培养瓶
④液氮或干冰容器
4.操作步骤:
①操作人员应戴防护面罩及手套,防止冷冻管可能爆裂之伤害。
②自液氮或干冰容器中取出冷冻管,检查盖子是否旋紧,由于热胀冷缩过程,此时盖子易松掉。
③将新鲜培养基置于37 °c 水槽中回温,回温后喷以70 % 酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。
④取出冷冻管,立即放入37 °c 水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化,以70%ethanol 擦拭保存管外部,移入无菌操作台内。
⑤取出0.9 ml 解冻之细胞悬浮液,缓缓加入有培养基之培养容器内(稀释比例为1:10~1:15),混合均匀,放入co2 培养箱培养。另取0.1 ml 解冻细胞悬浮液作存活测试。
⑥解冻后是否立即去除冷冻保护剂(例如dmso 或glycerol),依细胞种类而异,一般而言,大都不需要立即去除冷冻保护剂。惟若要立即去除,则将解冻之细胞悬浮液加入含有5-10 ml 培养基之离心管内,离心1,000 rpm, 5 分钟,移去上清液,加入新鲜培养基,混合均匀,放入co2 培养箱培养。
⑦若不需立即去除冷冻保存剂,则在解冻培养后隔日更换培养基。
公司为广大客户提供高质量的免疫学和生命科学相关产品。质量可靠,被全国各大院校科研机构认可并为elisa试剂盒标准品对照品长期供应商。我们将以专业执着,精益求精的精神服务于广大科研用户。
上一个:婚前协议书的格式
下一个:数据安全存储解决方案,电脑加密软件排行榜

如何选择上海画册设计制作公司呢?
嵌入式驱动开发应具备的三大基础
视觉设计包括哪些内容?
养花常用的肥料分为几类?
小米猫眼如何连上网络电视(小米猫眼如何连上网络设备)
移动公司移动和盒怎么缺货
超声波液位仪的应用
u盘文件没删除却消失了怎么办(u盘文件没有删除突然不见了)
龙游旅游景点有哪些+门票
红丝绒杯子蛋糕 红丝绒杯子蛋糕做法