土壤β-葡萄糖苷酶(β - GC)操作步骤

发布时间:2024-06-08
土壤β-葡萄糖苷酶(β - gc)操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/l,120 ng/l ,60 ng/l,30 ng/,15 ng/l)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48t的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48t的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂a50μl,再加入显色剂b50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(od值)。 测定应在加终止液后15分钟。
自身抗原抗体edc4抗体
e3泛素蛋白连接酶edd抗体
胚胎外胚层发育蛋白eed抗体
转录接头蛋白ep300抗体
内皮脂肪酶抗体
myc启动子结合蛋白1抗体
内质网蛋白29抗体
烯脂酰辅酶a水解酶抗体
磷酸化4e结合蛋白1抗体
三羟酰辅酶a脱氢酶抗体
限制过度增殖相关蛋白eml4抗体
ets1相关蛋白2抗体
efha1蛋白抗体
磷酸化转录因子e2f-1抗体
efhc1蛋白抗体
efhc2蛋白抗体
efhd1蛋白抗体
突触结合蛋白2抗体
核苷酸焦磷酸酶2抗体
长链烯脂酰辅酶a水化酶抗体
神经元,肌肉特异性烯醇化酶抗体
内皮分化型g蛋白偶联受体3抗体
上一个:背道而驰却是殊途同归的闲鱼和转转
下一个:金立手机账户锁怎么锁,怎么解金立手机锁

win7如何还原声音图标显示(win7如何还原声音图标位置)
采茶,一切的开始
珍爱网帐号被限制是什么意思(珍爱网账户被限制是怎么回事)
和仪表工聊聊双头螺栓的选用和保养
404页面文案原来还可以这样写
三星手机怎么锁屏幕,三星s3怎么设置锁屏密码
金属工件热处理后的硬度检测
贝巴鲁病毒PCR检测试剂盒实验规则
香瓜怎么保存久 香瓜保存方法
域名到期怎么办,如何防止域名被抢注