茶尺蠖小rna病毒5’端非编码区的克隆和测序及与哺乳动物小rna病毒的比较分析
发布时间:2024-01-29
用trizol从纯化的茶尺蠖ectropis oblique小rna病毒(eopv)中提取病毒基因组rna,逆转录后加poly(dt),然后进行两步pcr扩增基因组5’端。克隆测序后,对其5’端非编码区的核苷酸序列进行分析,发现具有哺乳动物小rna病毒的5’端非编码区的一些特征:a/t含量丰富、起始密码子上游aug和小顺反子多。利用mfold预测了eopv5’端非编码区的二级结构,存在4个茎环结构,有哺乳动物内部核糖体进入位点(ires)的保守区域,即含保守基序gnra的茎环a和a/c丰富的环b及多聚嘧啶区域。据此推测eopv基因组翻译采用ires起始机制。完成机构:武汉大学生命科学学院,武汉430072