紫外可见分光光度计的定量分析

发布时间:2024-01-14
紫外可见分光光度计的定量分析
紫外可见分光光度计是一种应用很广的分析仪器。当前已成为使用最多、覆盖应用面的分析仪器。它的应用领域涉及制药、医疗卫生、化学化工、环保、地质、机械、冶金、石油、食品、生物、材料、计量科学、农业、林业、渔业等领域中的科研、教学等各个方面,用来进行定性分析、纯度检查、结构分析、络合物组成及稳定常数的测定、反应动力学研究等。因为仪器涉及到光学、电学和结构等,所以它需要在一定的环境中应用。
定量分析
根据琅伯-比尔定律,样品的浓度和吸光度是成正比关系的,浓度越大,吸收值越高,所以分光光度计用的最多的还是定量分析,定量分析的种类有很多,这里介绍常用的几种定量分析方法:
a、法:法是紫外可见分光光度计诸多分析方法中使用最多的一种方法。这是一种以琅伯-比尔定律a=εbc为基础的分析方法,某一物质在一定波长下ε值是一个常数,石英比色皿的光程是已知的,也是一个常数。因此,可用紫外可见分光光度计在λmax波长处,测定样品溶液的吸光度值a。然后,根据琅伯比尔定律求出c=a/εb,则可求出该样品溶液的含量或浓度。
b、标准法:在选定的波长处,在相同的测试条件下,分别测试标准样品溶液c标和被测试样品溶液c样的吸光度a标和a样。然后,按下式求得样品溶液的浓度或含量。
c样=a样/a标×c标
c、标准曲线法
紫外可见分光光度计的定量分析方法是标准曲线法。即先用标准物质配制一定浓度的溶液,再将该溶液配制成一系列的标准溶液。在一定波长下,测试每个标准溶液的吸光度,以吸光度值为纵坐标,标准溶液对应得浓度为横坐标,绘制标准曲线。最后,将样品溶液按标准曲线绘制程序测得吸光度值,在标准曲线上查出样品溶液对应的浓度或含量。
d、 其它分析方法
除上述几个分析方法外经常使用的分析方法外,还有比吸收系数法、最小二乘法、解联立方程法和示差分光光度法。
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